小鼠视网膜色素上皮纯化培养
陈燕云 卢清君 王宁利
首都医科大学附属北京同仁眼科中心 100730
目的：培养小鼠视网膜色素上皮细胞（RPE），为研究RPE吞噬能力及其视网膜色素变性损伤机制等实验提供细胞来源。
方法：用Dispase法消化生后12天C57小鼠眼球后，刮除单层RPE，进行原代及传代培养。角蛋白抗体及其S-100抗体免疫荧光染色鉴定细胞。加入FITC标记的外节盘膜，观察RPE的吞噬外节盘膜的能力，籍以评价RPE体外培养后细胞生理功能状态。
结果：RPE在体外生长良好，胞浆内含有丰富的色素颗粒，随着传代次数的增加，胞浆内的黑色素颗粒逐渐减少，同一培养皿内，不同细胞可因细胞分裂次数不同而出现黑色素颗粒含量不同的情况。角蛋白抗体及其S-100抗体免疫荧光鉴定细胞均为阳性，纯化程度高。第1代至第3代RPE均能吞噬FITC标记外节，吞噬能力强。当传至第4代时胞浆内的黑色素颗粒基本消失，形态类似成纤维细胞，吞噬FITC标记外节能力弱。
结论：本实验成功纯化培养和鉴定小鼠RPE细胞，并且证实该培养的RPE细胞确实具备吞噬外节盘膜的能力，为进一步研究RPE细胞的功能及其视网膜色素变性的损伤机制奠定了基础。
关键词：视网膜色素上皮，培养
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