缺氧在RPE细胞上对EphB4受体及EphrinB2配体表达的影响
第四军医大学西京医院眼科、全军眼科研究所 710032
赵炜,王雨生,朱洁,张鹏,惠延年,马吉献
目的:观察EphrinB2配体和EphB4受体在RPE细胞上的表达以及缺氧对其表达的影响。方法:在细胞培养液中加入200µM CoCl2建立人RPE细胞缺氧模型,利用免疫荧光法观察EphrinB2及EphB4在RPE细胞上的表达,利用实时定量PCR以及Western blot法观察化学缺氧法对其表达EphrinB2和EphB4表达的影响,最后利用RNAi技术基因敲除HIF-1α,在缺氧条件下观察EphrinB2和EphB4表达的变化以及和HIF-1α表达的关系。结果:在人RPE细胞上存在EphrinB2和EphB4的表达,化学缺氧能够上调EphB4受体转录和翻译水平的表达,在转录水平,缺氧3h时,EphB4表达增加了3.2倍;其蛋白表达也相应在6h时表达达到峰值,而随后降低。在缺氧条件下,相应EphrinB2受体在转录以及翻译水平是下调表达的。利用RNAi技术基因敲除HIF-1α后,在缺氧条件下其相应EphB4受体的表达上调能够被阻断。结论:RPE细胞存在EphrinB2/EphrB4系统的表达,且和HIF-1α的表达相关,提示EphirnB2/EphB4在脉络膜新生血管的发生中具有一定的作用。 |