氯离子通道-3在内皮素-1对牛角膜内皮细胞增殖中的作用
胡维琨 张虹 李贵刚 项楠
华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科，武汉，430030
目的：研究氯离子通道-3（CLC-3）在内皮素-1（ET-1）对牛角膜内皮细胞（BCECs）增殖中的作用。
方法：实验设计采用完全随机设计，采用方差分析检验。免疫组化染色法检测增殖细胞核抗原的表达。免疫荧光测定CLC-3蛋白的表达部位。通过损伤模型检测细胞移行。MTT法检测细胞增殖，同时应用流式细胞仪检测细胞周期变化。RT-PCR、Western blot检测ClC-3 mRNA和蛋白的表达。
结果：体外培养BCECs在转录和翻译水平均有内源性CLC-3基因表达，表达产物定位于细胞膜和部分细胞浆。ET-1剂量依赖性的增加培养的BCECs CLC-3 mRNA和蛋白的表达，促进其增殖和移行，10 pmol/L时起作用，200 pmol/L时发挥最大作用。CLC-3反义寡核苷酸可以剂量相关性的下调CLC-3 mRNA及蛋白的表达，浓度依赖性抑制ET-1促进细胞增殖的作用，并使细胞周期停滞于G1期。
结论：ET-1可能通过开放氯通道，增加CLC-3 mRNA和蛋白的表达，使细胞进入增殖期，促进培养的BCECs增殖和移行。ET-1有望成为治疗角膜内皮细胞损伤的新型药物之一。
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