体外视网膜色素上皮细胞保持有神经分化的特性
杨玲玲 周庆军 王瑶 王宜强
山东省眼科研究所 山东省眼科学重点实验室 青岛市燕儿岛路5号 266071
目的:研究体外培养的胎儿视网膜色素上皮(RPE)细胞的干细胞及其分化特性。
方法:体外培养来自胎儿的RPE细胞,RT-PCR法检测ABCG2、hop、nestin、pax6的表达情况;采用神经分化培养液诱导RPE细胞的分化,分为添加和不添加牛眼视网膜提取物(BRE)组,免疫细胞化学染色检测GFAP、NSE、Nestin等神经标记物的表达,RT-PCR法检测otx-2、MITF、CRALBP、PEDF等基因的表达。结果:体外培养的胎儿RPE细胞能够表达ABCG2、hop、nestin、pax6等干细胞标记基因,经神经分化诱导后,细胞生长呈球状。诱导后细胞能够表达GFAP、NSE、Nestin等神经标记物;添加BRE后,Nestin的表达增强,GFAP、NSE的表达减弱。RT-PCR结果表明BRE能够促进诱导后RPE细胞otx-2、MITF、CRALBP、PEDF等RPE相关基因表达的增强。结论:体外培养的胎儿RPE细胞具有干细胞的一些特性,并保持着神经分化的特性,BRE能够促使其维持RPE细胞的分化特性。
关键词:视网膜色素上皮细胞、神经、分化、牛眼视网膜提取物
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