题目:肌节同源盒基因同系物2(Msx2)对晶状体发育的调节作用
作者:赵江月,张劲松
单位:中国医科大学附属第四医院眼科,辽宁省沈阳市和平区新华路11号,110005
目的:观察肌节同源盒基因同系物2(Msx2)对晶状体发育过程中晶状体上皮细胞周期的影响及对其他晶状体调节基因及结构基因的调控作用,探索Msx2对晶状体发育的调节作用
方法:培养alpha-TN4鼠晶状体上皮细胞系,利用脂质体将pEGFP-Msx2及pEGFP-Msx2 mutant质粒转染入细胞内,培养液内加入BrdU标记细胞,18小时后固定细胞,免疫荧光方法观察BrdU,anti-phospho-histone 3染色与GFP表达关系。利用Msx2基因敲除小鼠动物模型,采用原位分子杂交的方法观察胚胎不同时期(E10-13天)晶状体发育调节基因Pax6,FoxE3,Six3,Prox1等及Mip等结构基因的转录变化。
结果:免疫荧光分析结果为GFP表达阳性的晶状体上皮细胞无BrdU染色,anti-phospho-histone 3染色呈阴性。原位分子杂交结果显示Msx2与其他转录调节基因发生作用,共同调节晶状体发育过程。
结论:Msx2通过影响晶状体上皮细胞的细胞周期及调节其他晶状体调节基因对晶状体发育起调控作用。 |