| 目的：小梁细胞细胞外基质对房水外流有重要影响。本实验选择0.004%Travoprost的原形药物PGF2α和2%硝酸毛果云香碱为实验对象，通过分析两种药物联合使用对培养的猪小梁细胞主要细胞外基质纤维连接蛋白（Fibronectin,FN）和层粘蛋白（Laminin,LN）的影响，来探讨前列腺素类似物与拟胆碱能药物联合使用对常规房水外流途径的影响。方法：用组织块培养法及酶消化法培养猪小梁细胞，将传代到载玻片上并贴壁的第五代猪小梁细胞分成对照、Pilcoarpine处理组、PGF2α处理组以及联合用药组，分别加入等量0.001%乙醇、200nM硝酸毛果云香碱、20nM前列腺素F2α（含0.001%乙醇）以及200nM硝酸毛果云香碱与20nM前列腺素F2α混合液（含0.001%乙醇），生长48小时，固定后进行特异的Anti-FN和Anti-LN免疫荧光染色，用根据MeridianTM Ultima 212共聚焦激光显微镜检测Fibronectin 、laminin荧光的相对数值，进行统计学分析。结果：用组织块法和酶消化法成功培养猪小梁细胞，根据形态、生长特性及Anti-FN、Anti-LN、Anti-NSE免疫组织化学染色呈强阳性特征，鉴定所培养细胞为小梁细胞。对药物处理后的小梁细胞进行Anti-FN和Anti-LN免疫荧光染色，结果显示Pilocarpine组、PGF2α组、联合用药组分别使细胞外FN的量下降17.1%、41.4%、50.4%，使细胞外LN的量分别改变+0.45%、-21.3%、-36.8%。结论： Pilocarpine对小梁细胞外基质无显著影响，PGF2α可以显著的减少细胞外基质，联合用药较单独用药减少细胞外基质的作用增加。 |
