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| 年龄相关性白内障晶状体前囊上皮细胞基因表达谱变化 |
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| 作者：吴明星, … 文章来源：中山大学中山眼科中心 510060 点击数1311 更新时间：2004/6/8 文章录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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| 目的：研究年龄相关性白内障晶状体与正常透明晶状体前囊上皮细胞基因表达谱差异，探讨年龄相关性白内障发生的分子机制。
方法：分别收集白内障超声乳化吸除术中连续环形撕囊的直径约6mm 的囊膜片于RNAIN保存液中备用；并收集中山眼科中心眼库中来自于急性创伤致死的供体眼球的晶状体前囊中央约直径6~8mm的囊膜片于相同的保存液中备用。用TRIZOL提取总RNA，逆转录合成cDNA，纯化后用商用试剂盒的T7 引物合成cDNA 第一条链，第二条链合成完毕后，进行双链cDNA纯化，酚-氯仿提取，甲醇沉淀。RNA转录标记盒用来制备CY3/CY5荧光标记的cRNA（标记探针）。标记的cRNA用纯化试剂盒纯化。将CY3/CY5标记的cRNA片段与人基因表达谱芯片(深圳微芯生物公司)杂交，按试剂盒说明书进行常规染色。杂交后的芯片经洗脱未杂交的探针。利用扫描仪进行扫描；扫描后将图像转化为基于荧光强度的数字信号进行数据分析和处理。
结果：微芯生物公司人类基因表达谱芯片共有8064个基因点。共有7488个克隆片段，其中7458个为表达基因片段，其他30个为空白载体片段。扫描结果有3313个数据为有效数据，共有724个基因存在显著性表达变化，其中与对照组相比实验组中有286个基因发生了上调表达变化，有438个基因发生了下调表达变化；与正常对照组相比在实验组中表达下调的基因明显多于表达上调的基因，提示在实验组中存在基因表达被抑制的趋势。与眼晶体结构相关的基因发生了明显的表达变化。按照基因功能分类标准对芯片结果进行初步分析发现可能与疾病过程相关的基因类型包括与细胞骨架结构相关的基因；与细胞增殖生长及细胞凋亡相关的基因；与细胞应激反应相关的基因。
结论：年龄相关性白内障的晶状体前囊上皮细胞与正常透明晶状体比较，其基因表达谱表现为明显的基因下调趋势。且主要表现在细胞骨架结构相关的基因；与细胞增殖生长及细胞凋亡相关的基因；与细胞应激反应相关的基因表达被抑制的趋势。
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