| 目的：探讨水蛭提取液对成人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)细胞转分化及与此有关的wnt/β-catenin信号通路的影响。 方法：用64mg/ml水蛭提取液作用于人RPE细胞，采用倒置显微镜观察细胞形态、免疫组化染色观察细胞标志物；免疫化学染色法检测RPE细胞β-catenin蛋白的表达；用RT-PCR、western-blot方法分别从基因、蛋白水平检测hRPE细胞内β-catenin的变化。结果: 64mg/ml水蛭提取液作用于成人RPE细胞后, 可使RPE细胞表达NSE和GFAP（以6小时和12小时最明显）。CK和NSE染色细胞可见突触形成和空泡状核的神经上皮细胞形态的特征性改变。水蛭提取液能使β-catenin核转位；使β-catenin蛋白在hRPE细胞中存在过表达，其中以1小时和2小时尤为明显（P＜0.05）。细胞内β-catenin表达增加。结论: 64mg/ml浓度的水蛭提取液能诱导人RPE细胞向神经细胞转分化，其机理可能与增强wnt/ β-catenin信号转导通路在人RPE细胞中的表达有关。 |
