| 目的 研究新研制的灌流培养系统对器官培养保存兔角膜的生存环境、内皮细胞活性的影响，检验其在器官培养角膜保存中的应用效果。方法 利用新研制的角膜灌流培养系统以及传统的密闭和定期换液保存3种方式对60只兔角膜进行器官培养保存实验，每种方法又按保存时间1w、2w、3w、4w分为四个小组，每小组各保存5只角膜，另有2只角膜进行灌流培养保存2月。保存到期后，检测培养液中pH值、葡萄糖、乳酸、微生物学等指标；对各组角膜片行锥蓝联合茜素红活性染色计算CEC密度、死亡率、六角形细胞百分率；对保存时间最长组角膜行Na+-K+ATP酶及琥珀酸脱氢酶酶组织化学染色及透射电镜观察。结果 不同保存方式间比较显示，灌流培养能够提供相对稳定的培养环境，有效地防止污染。经灌流培养后的角膜与其他方法保存后的相比拥有更高的CEC密度、更好的酶组织活性以及细胞超微结构。结论 动物模型结果表明，灌流培养可以优化角膜的生存环境，更接近体内的生理条件，可以在较长时间内有效保存CEC活性，灌流培养比传统密闭及定期换液培养更具优势。 |
