目的 观察新型人造胶体羟乙基淀粉的最新剂型HES130/0.4对器官培养法保存角膜的脱水效果,探讨其成为新型角膜脱水剂的可行性。方法 18对配对兔角膜片,一半于ACF器官培养液中保存28d,然后葡聚糖T500脱水48h作为对照组;另一半于含10%HES 130/0.4的ACF培养液中保存28d作为实验组,不再另外行脱水程序。保存结束进行角膜内皮细胞活性检测和植片质量评估,评价指标包括:内皮细胞计数、角膜厚度和角膜含水量、角膜透明度和后弹力层皱褶程度、肌动蛋白微丝(filament actin,F-actin)在内皮层中的表达程度,及透射电镜下CEC超微结构的变化。结果 保存结束后,含10%HES130/0.4的实验组的植片明显较薄,角膜透明度和皱褶程度也优于对照组,但内皮细胞密度值略低于对照组,为2367±335个/mm2。对照组经葡聚糖T500脱水后,角膜厚度和透明度与实验组间差别变小,但内皮细胞密度值明显降低达2105±328个/mm2。免疫组织化学染色证实F-actin在两组角膜内皮层都有表达,免疫印迹法进一步证实实验组的表达水平高于对照组。结论 HES130/0.4能有效避免器官培养过程中角膜过度水肿,且细胞毒性小,可以成为器官保存液中的持续添加组分。它的应用也简化了保存程序,在一定程度上减轻了感染风险,有希望成为新型角膜脱水剂。 |