目的 应用器官培养法保存角膜,检测保存角膜的Na+-K+-ATP酶活性和水通道蛋白-1表达改变,探讨Na+-K+-ATP酶活性和水通道蛋白-1表达改变在保存角膜水肿中的作用机制。
方法 24只角膜用器官培养法保存4周,检查角膜厚度、内皮细胞密度的变化,测量内皮细胞Na+-K+-ATP酶活性的改变,应用免疫组化染色和实时荧光定量PCR检测水通道蛋白-1(AQP-1)表达的改变,并与新鲜角膜相比较。结果 器官培养保存4周后角膜厚度明显增厚、水肿,经脱水液脱水后达到683.60±48.92μm;内皮细胞密度由2742.61±124.02个/mm2减少为2381.56±174.27个/ mm2,丢失率约为14.08±1.15%;Na+-K+-ATP酶活性由3.82±0.27U/mgprot降低为3.58±0.26U/mgprot;水通道蛋白-1的表达降低。结论 器官培养法保存的角膜厚度增加,内皮密度降低,Na+-K+-ATP酶活性轻度下降,水通道蛋白-1的表达降低;保存后细胞密度能满足角膜移植的要求;保存的角膜水肿可能与Na+-K+-ATP酶活性和内皮AQP-1表达降低有关。关键词:角膜,器官培养,保存,Na+-K+-ATP酶,水通道蛋白-1 |