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| 蕈类提取新型抗病毒蛋白RC28的研究 |
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| 作者：刘旭阳, … 文章来源：四川大学华西医院眼科/眼科学研究室 点击数629 更新时间：2011/5/13 11:58:00 文章录入：毛进 责任编辑：毛进 |
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| 目的：从皱盖罗鳞伞Rozites caperata(Cortinarious caperata)中分离纯化出一种抗病毒蛋白RC28。通过分离纯化、基因克隆、安全性及抗病毒活性检测等研究，阐明RC28的分子结构、抗病毒效果及毒副作用等。
方法：(1)在皱盖罗鳞伞的PBS提取液中, 用丙酮沉淀后凝胶过滤和离子交换层析的方法，分离纯化出RC28。(2) 用Edman降解法测得RC28的前30位氨基酸残基序列，通过3'-RACE法克隆出了RC28的cDNA序列。(3) MTT法检测RC28的细胞毒性。(4) 抗病毒活性试验检测RC28广谱的抗病毒特性。(5) 小鼠病毒性角膜炎模型研究RC28的抗HSV-1的活性。
结果：从皱盖罗鳞伞中分离纯化出一种具有抗病毒蛋白RC28，用MALDI-TOF质谱法测得此蛋白分子量为28.251kDa。Edman降解法测得RC28的前30位氨基酸残基序列为MLTYRGKLNWYNYAVNEGFTLILPGXELKV，通过3'-RACE法克隆出了RC28的cDNA序列。RC28肽链全长具有235氨基酸残基，并且其天然蛋白需进行翻译后修饰。细胞毒性测试表明RC28的细胞毒性非常弱，抗病毒活性测试表明RC28 具有较宽的抗病毒谱，能抗单纯疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV-1）、Rous肉瘤病毒（Rous sarcoma virus，RSV）、A型流感病毒（influenza virus type A）等病毒。通过小鼠病毒性角膜炎模型研究RC28的抗病毒活性，表明RC28可延迟角膜炎的发生并降低了疾病的严重程度。
结论：从蕈类分离出一种新型的抗病毒蛋白RC28。该蛋白具有高效广谱的抗病毒作用。对RC28进行深入研究，为将来开发一种新型抗病毒性药物奠定基础。 |
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