| 目的 大鼠尾芽胚视杯视网膜干细胞的分离、体外培养和鉴定研究。
方法 获取LongEven大鼠尾芽胚胚胎，分离视杯获得单细胞悬液进行体外无血清培养，利用单细胞克隆技术分离具有单细胞克隆能力的细胞群，选取单个克隆进行连续传代培养获得大量亚克隆，并进行有血清条件下体外诱导和模拟体内环境诱导的观察，采用免疫荧光细胞化学技术检测Chx-10和分化后视网膜各种类型特异性标记的表达。
结果 从尾芽胚视杯中成功地分离出视网膜干细胞，该细胞群具有连续克隆能力，表达Nestin和Chx-10(视网膜干细胞标记)，在体外诱导的条件下，可表达视网膜终末细胞标记PKC(双极细胞标记)、GFAP(Müller细胞标记)、Thy1(神经节细胞标记)，少数细胞表达Nestin和MAP2，在模拟体内环境诱导后，则不仅表达上述细胞标记，而且Rhodopsin(视杆细胞标记)和Syntaxin(无长突细胞标记)表达阳性。
结论 从大鼠尾芽胚视杯中分离的细胞具有自我更新能力和多分化潜能，表达视网膜干细胞标记，有很强的增殖能力。是视网膜的干细胞。
[国家自然科学基金资助项目（30270457）]
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