目的 应用193nm准分子激光从胎兔Bruch's膜上切削脉络膜获得视网膜神经上皮及色素上皮联合移植片。
方法:E21胎兔冰浴下摘除眼球并去除巩膜、前节和玻璃体,制成neuroretina-RPE-BM-choroid复合体。将复合体脉络膜面向上平铺于7mm圆形明胶片(50%明胶,震动切削150μm厚)上,置于底衬蓝色的培养皿中。采用193nm准分子激光,PTK模式发射,切削区域均以后极部为中心,直径6.5mm,80-130pulses,以肉眼下切削区域可透见映衬其下的蓝色为可。将切削后的标本浸泡于4%多聚甲醛中固定2-3d,石腊包埋、切片、HE染色。
结果:200倍光镜下观察,取材在后极部的标本见130pulses刚好切削脉络膜至RPE基底处,并可见到正常复合体的移行带;而80pulses切削则残留较多脉络膜组织。取材近周边部或赤道部标本用50-80pulses切削可去除脉络膜组织。
结论:准分子激光切削脉络膜可获得较好的视网膜神经上皮及色素上皮联合移植片,避免了用酶消化对视网膜神经上皮的破坏,且操作简捷。本实验胎兔眼取材近后极部以小于140pulses为宜,取材近周边部或赤道部标本以50-80pulses为宜。对不同的供体组织、不同的取材部位,需要摸索采用不同的切削点数而获得相同的切削深度。
关键词:准分子激光 视网膜移植片
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