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丙丁酚对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF表达的影响
作者:彭辉灿  文章来源:南华大学附属第二医院眼科  点击数298  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的  研究不同浓度的丙丁酚(普罗布考 probucol)对体外培养的高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells, HRCECs)增殖及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor VEGF)表达的影响,为糖尿病视网膜病变药物防治提供新的思路和理论依据。
方法  体外培养从角膜移植术后新鲜人眼球提取的HRCECs。取生长良好的第3 ~4 代细胞用于实验,实验分为低糖对照组、高糖对照组、高糖+(5µmol/L、10µmol/L、20µmol/L、40 µmol /L、80µmol/L )不同浓度丙丁酚组,用噻唑蓝比色法(MTT)检测24h不同质量浓度的丙丁酚对高糖环境下HRCECs增殖的抑制作用,用免疫细胞化学法检测细胞VEGF的表达。
结果  1、MTT比色法结果显示:不同浓度的丙丁酚(5µmol/L、10µmol/L、20µmol/L、40µmol/L、80µmol/L )作用于原代培养的HRCECs24h,细胞增生抑制率分别为8.40%、20.84%、34.90%、45.32%、55.38%。一定质量浓度范围内丙丁酚可抑制高糖环境下HRCECs的增殖(P 。低糖对照组与高糖对照组相比无明显统计学意义(P =0.065>0.05)。2、低糖、高糖对照组与丙丁酚浓度分别为(5µmol/L、40µmol/L、80µmol/L)加药组作用于HRCECs24h,免疫细胞化学检测VEGF的表达,背景灰度值与阳性灰度值之差分别为28.75±3.77、71.93±8.37、54.67 ±4.33、41.43± 3.45、29.18±3.37。与高糖对照组相比,加药组作用HRCECs24h VEGF表达明显下降(P<0.05),且随着药物浓度的提高,VEGF的表达量逐渐减少。与低糖对照组相比,高糖对照组VEGF的表达明显增加(P<0.05)。<0.05),且随着药物浓度的提高,细胞抑制率逐渐提高
结论  1、丙丁酚能抑制体外培养的高糖环境下HRCECs的增殖,且呈质量浓度依赖性;2、丙丁酚能下调体外培养的高糖环境下HRCECs的表达,呈质量浓度依赖性;3、丙丁酚抑制体外培养的高糖环境下HRCECs的增殖可能是通过下调其VEGF表达而发挥作用。
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