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NS-398对真菌性角膜炎IL-10表达影响的实验研究
作者:赵桂秋  文章来源:青岛大学医学院附属医院眼科  点击数292  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 观察白细胞介素10(interleukin-10, IL-10)在大鼠真菌性角膜炎组织中的表达情况,给予选择性COX-2抑制剂NS-398,观察药物干预前后IL-10的变化并分析其意义。
方法 健康Wister大鼠90只,雌雄不限,随机分为3组,A组10只(10眼)为空白对照组、B组40只为真菌感染模型组、C组40只为模型加药物干预组,A组不予处理, B、C两组,右眼均为实验眼,建立真菌模型,左眼为实验对照眼,置角膜接触镜。采用自制角膜接触镜法在刮除上皮的大鼠角膜涂布茄病镰刀菌标准菌落,建立角膜真菌感染模型。模型建立后B、C两组分别于模型建立后第1天打开眼睑,B组给予PBS滴眼,C组给予NS-398滴眼,每日4次。造模后第1d、3d、7d、14d处死大鼠,取角膜。HE染色、PAS染色观察角膜组织病理变化和真菌生长方式,同时运用免疫组织化学和RT-PCR技术检测两组在不同时间点IL-10蛋白及基因水平的表达情况。
结果 1、组织病理学观察见真菌性角膜炎病灶内有大量中性粒细胞浸润并伴有严重的组织坏死,PAS染色检查见菌丝及孢子可达基质浅层及中层。2、IL-10在空白对照及实验对照组角膜基本不表达;B组在接种真菌后IL-10的表达先增高后降低,各时间点比较差异有显著性(P<0.01);C组与B组接种真菌后比较,第1d IL-10表达差异无显著性(P>0.05),3d下降、7d、14d表达明显增高,差异具有显著性(P<0.01)。
结论 1、角膜接触镜法可以成功的建立大鼠镰刀菌性角膜炎动物模型,并已为PAS染色、10%氢氧化钾涂片及组织刮取物行菌落培养所证实。2、IL-10表达于真菌性角膜炎组织中,提示IL-10可能参与了真菌性角膜炎的发生与发展,NS-398可增强真菌性角膜炎角膜组织中IL-10的表达,即使在病变后期IL-10也有较强的表达,同期角膜组织的混浊,提示IL-10可能参与了角膜组织的抗损伤修复过程。
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