目的 骨髓间质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是骨髓中存在的除造血干细胞外的另一类干细胞,具有向心肌、骨、视网膜神经节样细胞等多向分化潜能,已成为细胞治疗和组织工程的理想种子细胞。但因BMSCs数量、增殖、分化能力随着机体年龄增长明显下降,而影响细胞移植治疗效果。本研究比较了中药地黄饮子、右归丸诱导BMSCs向视网膜神经节样细胞分化的情况,以期为视网膜退行性疾病提供治疗方案。
方法 采用全骨髓贴壁筛选法体外分离培养Wistar大鼠BMSCs,观察BMSCs的增殖情况并进行鉴定;制备中药地黄饮子、右归丸大鼠血清,以其诱导BMSCs,观察BMSCs的神经分化情况,并行免疫组化鉴定。
结果 体外培养获得了较纯的BMSCs,流式细胞术检测 CD90+CD45-细胞纯度达到97.0%;与空白组比较,地黄饮子含药血清诱导后72h, BMSCs胞体收缩成锥形或球形,细胞突起变细、变长,呈神经细胞的典型形态;免疫组化结果显示,部分细胞呈神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(nestin)阳性表达明显升高(P<0.05),右归丸含药血清组与空白组比较没有明显差异。
结论 地黄饮子可促进骨髓间充质干细胞向视网膜神经节样细胞分化。 |