目的 研究人脂肪间充质干细胞体内外分化为视网膜色素上皮细胞、光感受器细胞和血管内皮细胞以及对视网膜变性大鼠的治疗作用。
方法 分离、培养人脂肪间充质干细胞(hADSCs);体外诱导hADSCs向血管内皮、视网膜色素上皮和光感受器细胞分化,并且观察vWF、视紫红质、Pan-CK的表达;建立视网膜变性大鼠模型;将60只大鼠随机分为6组,每组10只,其中5只大鼠尾静脉注射hADSCs悬液,另外5只大鼠注射等量PBS液。术后1天、1周、2周、3周、6周、3月分别处死一组动物,摘除眼球行病理切片,观察视网膜形态、视网膜细胞增殖情况和hADSCs的分布;用抗Rhodopsin、抗MITF、抗vWF抗体分别进行荧光双染,观察人脂肪间充质干细胞的分化情况。
结果 hADSCs在体外诱导可以表达视网膜色素上皮细胞、光感受器细胞和血管内皮细胞标志;hADSCs移植组大鼠视网膜修复和早期增殖情况好于阴性对照组;移植后第1、2周就可以检测到hADSCs整合到宿主RPE层和脉络膜毛细血管,第3周还可以检测到hADSCs表达血管内皮细胞、视网膜色素上皮细胞和光感受器细胞的标志。
结论 人脂肪间充质干细胞可以在体内、外向视网膜色素上皮细胞、光感受器细胞和血管内皮细胞分化,并在视网膜变性大鼠中参与脉络膜毛细血管和视网膜的重建,促进视网膜修复。 |