目的 观察 RNA干扰技术沉默Smad4基因表达对TGF-β2介导的人晶状体上皮细胞增殖及上皮间质转分化的影响,探讨Smad4在后发性白内障进展中的作用。
方法 设计并合成靶向人Smad4基因的小干扰RNA(small-interferingRNA,siRNA),脂质体介导稳定转染人晶状体上皮细胞,分别用RT-PCR和Westernblot检测转染前后Smad4mRNA及蛋白表达水平的变化,将浓度为10ng∕ml的TGF-β2分别加入Smad4基因沉默和正常的人晶体细胞中,并设立空白对照组,用MTT法检测细胞增殖情况,RT-PCR和WesternBlot检测α-SMA,Fibronectin的表达。
结果 人晶状体上皮细胞的Smad4mRNA和蛋白表达水平均显著下降,转染SiRNA沉默Smad4基因表达后人晶状体上皮细胞人晶状体上皮细胞的体外增殖能力显著增强(P<0.05),α-SMA,Fibronectin的表达明显减弱 (P<0.05)。
结论 Smad4在TGF-β2介导的人晶状体上皮细胞增殖及上皮间质转分化中起重要作用,是后发性白内障治疗的重要靶点。 |