目的 尽管天然免疫的模式识别受体(TLRs)种类较多,但MyD88是TLRs信号转导途径的主要接头蛋白。本研究探讨MyD88在角膜移植术后免疫反应中的作用,探索天然免疫与角膜移植排斥反应的关系,发掘排斥反应的启动机制。
方法 建立同种异体角膜移植的大鼠模型,以自体角膜移植和同种异体角膜移植激素抗排斥的大鼠模型为对照,术后通过裂隙灯观察大鼠角膜的变化,排斥反应指数评分,于术后5天、7天和9天取材,进行组织病理学检查,分别采用RT-PCR、免疫组化和免疫荧光、共聚焦检测MyD88 mRNA、蛋白在角膜的表达及细胞定位。
结果 术后角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊、新生血管生长。同种异体角膜移植组平均排斥反应指数在术后7d符合排斥反应的诊断并获病理学支持。正常角膜组织可见MyD88 mRNA表达;三个手术干预组角膜MyD88 mRNA表达的差异倍数均明显高于正常对照组,同种异体角膜移植组术后9天的MyD88 mRNA的表达显著高于其他两组(P<0.05)。免疫组化及免疫荧光检测正常角膜各层均可见MyD88蛋白表达,MyD88主要表达在细胞浆。移植术后各组角膜各层均可见MyD88蛋白表达,同种异体角膜移植组角膜基质层MyD88阳性细胞明显增多。自体移植组和同种异体角膜移植激素抗排斥组角膜基质层MyD88阳性细胞轻度增多。
结论 同种异体角膜移植术后9d MyD88 mRNA表达显著性增加,基质层MyD88阳性的细胞显著增多,提示天然免疫的模式识别受体可能通过MyD88下传信号、参与同种异体角膜移植术后的免疫排斥过程。此外,激素可能通过抑制MyD88的表达而发挥抗排斥作用。 |