| 目的：初步研究自体骨髓间充质干细胞（Mesenchymal stem cells MSCs）替代角膜内皮细胞（Corneal Endothelial Cells CECs）移植到兔角膜内皮部位后其形态和功能的分化。方法：体外培养的自体 MSCs用Brdu标记后接种在Gelatin膜载体上；利用ɑ－氰基丙烯酸脘基酯作为组织黏合剂，将接种有MSCs的载体与机械去除了内皮细胞的自体兔角膜植片相粘合，原位缝合进行兔眼MSCs移植；对照设置两组，一组移植体外培养的CECs，另一组移植没有接种任何细胞的载体膜。术后观察兔眼角膜移植片的透明情况、角膜厚度和眼压，并利用共焦显微镜进行移植细胞的形态观察和计数。术后观察12周，处死动物，角膜标本分别进行组织切片、抗Brdu单克隆抗体免疫组化染色和电镜观察。结果：我们对19只新西兰白兔的右眼进行了自体MSCs移植，19只兔的右眼进行了CECs移植，另外12只兔的右眼作为对照仅移植没有细胞的载体。术后2周，所有植片均发生了水肿，并逐渐浑浊。对照组角膜植片持续水肿，逐渐浑浊；自体MSCs移植组术后8周左右植片水肿才逐渐减轻，角膜透明度开始恢复；CECs移植组植片在术后4周左右水肿逐渐减退，开始恢复透明；术后12周时，移植片上细胞的平均密度为：CECs移植组2023±330cells/mm2，MSCs移植组2105±677 cells/mm2 。扫描电镜显示MSCs移植在角膜内皮位置后12周逐渐分化成为形态类似多角形的细胞。结论： CECs移植将来有可能成为治疗角膜内皮层病变和损伤的一种治疗手段，而自体MSCs细胞替代CECs进行移植后，这些细胞在角膜内表面可以分化成为一种类似角膜内皮细胞形态和功能的细胞。 |
