目的 研究正常人眼巩膜成纤维细胞毒蕈碱受体(M受体)的分布。
方法 应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞,用逆转录-聚合酶联反应(RT-PCR)及Northern blot检测体外培养的人巩膜成纤维M受体各亚型mRNA的表达;以间接免疫荧光 (IIF)实验及Western Blot检测培养的人巩膜成纤维细胞上M受体各亚型受体蛋白的表达;并运用免疫组化实验(SABC法)来检测M受体各亚型在巩膜组织中的成纤维细胞的分布。
结果 培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤型,平均分裂时间为2~3天左右,细胞生长旺盛,近融合时细胞成规则排列的纺锤型。RT-PCR及Northern blot实验结果显示人巩膜成纤维细胞有m1-m5受体mRNA的表达。IIF实验及Western Blot结果显示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达m1-m5受体蛋白。
结论 人巩膜成纤维细胞具有m1-m5受体的分布。巩膜上M受体的存在预示着M受体在调节巩膜成纤维细胞信号的转导,影响巩膜细胞外间质的合成及巩膜的重塑中发挥着重要的作用。巩膜上的M受体可能参与了近视的眼轴延长及近视屈光度的改变。
本课题获得国家自然科学基金资助(30371507)
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