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不同载体组织工程角膜上皮膜片的功能性评价
作者:李翠霞  文章来源:北京大学第三医院眼科  点击数254  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进

目的 通过制备不同载体组织工程角膜上皮膜片,观察角膜缘干细胞在不同载体上的生物学特性及角膜缘干细胞与不同载体组织相容性,探索三种不同载体组织工程角膜上皮膜片的临床应用前景。
方法 分别在去上皮羊膜、纤维凝胶膜片、和去上皮的浅层基质上,用组织块培养法原代培养兔角膜缘干细胞方法,构建组织工程角膜上皮膜片。倒置显微镜观察三种不同组织工程角膜上皮膜片的角膜缘干细胞的生长状况;通过细胞免疫荧光技术检测CK3、ABCG2两种单克隆抗体的表达,对三种不同组织工程角膜上皮膜片的角膜缘干细胞进行鉴定;冰冻切片HE染色、透射电镜技术观察角膜缘干细胞与各种载体的相容性。
结果 倒置显镜观察三种组织工程角膜上皮膜片上的角膜缘干细胞与在培养皿中培养的角膜缘干细胞生长无差异,显微镜下呈铺路石状。对三种组织工程角膜上皮膜片的兔角膜缘上皮细胞应用CK3和ABCG2单克隆抗体进行免疫组织化学检查,可见培养的角膜缘干细胞细胞CK3和ABCG2单克隆抗体均为阳性。HE染色显示三种载体与角膜缘干细胞贴附良好,电镜下观察可见细胞形态不一,呈圆形或椭圆形,核浆比大,细胞间有紧密连接,桥粒清晰。
结论 角膜缘干细胞在三种不同载体上生长良好,能很好的保持角膜缘干细胞的特性;载体与细胞相容性好,膜片的角膜缘干细胞能很好的维持上皮细胞特有的超微结构。 

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