| 目的 观察小鼠胚胎干细胞在人羊膜及兔眼表结膜基质上分化发育的情况。
方法 将表达绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）基因的小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜上共培养4天，用5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）标记后移植到新西兰兔眼表结膜缺损区，分别于移植后1，2，3，4，6和8周，摘取各组实验眼行荧光显微镜、组织学和免疫组织化学检查，荧光检测ES-GFP细胞在组织中的荧光表达，组织学检查移植到结膜基质的ES-GFP细胞的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况；免疫组织化学检测移植到结膜基质的带有BrdU标记的ES-GFP细胞CK3/CK12和CK13的表达。
结果 小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜后能在羊膜上贴附生长，与羊膜共培养4天后部分ES-GFP细胞分化为多角形细胞，将负载有ES-GFP细胞的羊膜移植到兔结膜缺损区, 术后荧光显微镜可在结膜上皮层检测到绿色荧光带, 免疫组织化学检测结膜上皮层CK13表达阳性，CK3/CK12表达阴性，在重建的结膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞，未见异常增殖细胞。
结论 采用人羊膜负载小鼠ES细胞行兔结膜移植，小鼠ES细胞能在兔结膜基质存活并分化为结膜上皮样细胞。
|
