目的  利用人类胎眼来源的视网膜色素上皮细胞模型，研究claudin-19蛋白如何参与紧密连接的形成、如何调节连接的功能，并探讨claudin-19蛋白发挥作用的相应机制，从而为深入了解相关疾病的发病机制提供依据。

方法  构建claudin-19 siRNA质粒转染细胞，比较siRNA转染组与对照组之间视网膜色素上皮细胞在超微结构，跨上皮电阻，细胞迁移能力及紧密连接复合物中其他蛋白成员在表达水平、分布状态和磷酸化修饰状态的改变。

结果  紧密连接蛋白claudin-19不仅是细胞中含量最丰富的蛋白之一，当应用特异性的SiRNA 下调视网膜色素上皮细胞内源性claudin-19蛋白的表达量约70%后，发现视网膜色素上皮细胞的跨上皮细胞电阻下降约80%， 由于跨上皮细胞电阻是一种间接体现屏障功能的方法，跨上皮细胞电阻的降低与紧密连接结构的丧失直接相关，所以确定下调内源性claudin-19的表达可以诱导屏障功能的破坏；通过电镜观察发现Claudin-19 siRNA转染组细胞出现顶膜回缩，顶部微绒毛减少，紧密连接复合物完整性下降，紧密连接结构减少；伤口愈合试验测定Claudin-19 siRNA转染组细胞迁移增加；下调Claudin-19的表达一方面可导致连接相关蛋白ZO-1、occluding、claudin-3 、claudin-4、 claudin-7mRNA水平及蛋白水平相应改变，另一方面免疫荧光结果显示连接分子ZO-1、occluding蛋白荧光信号减弱，膜定位染色模式减少，蛋白定位与膜的相关性下降，蛋白呈弥散的胞浆分布模式或呈团块状分布于胞质内，ZO-1磷酸化程度升高和occludin磷酸化水平降低。

结论  确定Claudin-19蛋白是参与人类胎眼视网膜色素上皮细胞间紧密连接形成及功能调节的新因子，Claudin-19蛋白诱导的磷酸化修饰可能是导致细胞连接结构和功能破坏的机制之一。