目的:树突状细胞(DC)是目前所知的机体内功能最强的抗原提呈细胞,是机体免疫应答的始动者,在免疫应答的诱导中具有独特的地位。本研究用抗树突状细胞单克隆抗体(DC-mcAb)抑制树突状细胞,观察对大鼠角膜移植排斥反应的影响。方法:1. Wister大鼠25只为供体,SD大鼠50只为受体,随机均分5组,行角膜移植手术。术前3天及术日、术后1、2、3、5、7、9、11天给药,A组:腹腔注射灭菌注射用水0.5ml,A0组:腹腔注射小鼠抗大鼠IgG0.1ml+灭菌注射用水0.4ml ,B、D组:DC- mcAb0.1ml+灭菌注射用水0.4ml,C组结膜下注射DC- mcAb0.05ml。A-C组常规角膜移植手术,植床植片直径均为3.5mm ,D组保留受体上皮瓣。手术均在受体鼠右眼进行。排除发生虹膜嵌顿、前房积血等病例。术后裂隙灯观察,记录各组角膜排斥发生的时间。2.Wister大鼠32只为供体,SD大鼠64只为受体,均分为A、B、C、D组、手术方式及用药同前。各组分别于术后3、7、14和21天各取4只植片,HE染色及免疫组织化学染色观察穿孔素(PFR)和颗粒酶B(GB)的表达。3. Wister大鼠2只为供体,SD大鼠4只为受体,均分为A、B组、手术方式及用药同前。各组于术后7天取植片, RT-PCR法检测植片中IFN-γ的表达。4.取病理标本的同时采集血清,测IL-2含量。结果:1.排斥时间A组与A0 组相比,差异无显著性(P>0.05);A组与B 、C 、D 组比,差异有显著性(p<0.001);C组与B、D组比,差异有显著性(p<0.001);B组与D组比,差异无显著性(P>0.05)。2.PFR和GB的表达在术后14天达高峰,21天有所下降。A组的表达明显高于B、C、D组,差异有显著性(p<0.05);C组在术后14,21天时与B、D组有差异(p<0.05);B组与D组无明显差异(P>0.05)。3. IFN-γ术后7天时在A组中的表达明显高于B组。4.血清IL-2的结果与免疫组化结果相想一致。结论:抗树突状细胞单克隆抗体减轻角膜移植排斥反应,延长植片存活时间。 |