目的 观察并研究多聚物-1(Cop-1)免疫的大鼠青光眼模型视网膜上小胶/巨噬细胞的形态和功能变化,推测Cop-1引起的小胶、巨噬细胞变化在其对大鼠青光眼视神经保护方面可能发挥的作用和机制。
方法 64只青光眼成模Wistar雌性大鼠,随机分入两组,分别为:Cop-1免疫高眼压组(Cop-1组)32只大鼠,PBS免疫高眼压组(PBS组)32只大鼠,另取4只未处理大鼠(正常组)。于免疫后3d, 7d, 10d, 17d, 24d,31d,分别用免疫组织化学法和免疫蛋白印迹法(Western-blot法)检测不同组别大鼠视网膜上小胶细胞、巨噬细胞活化和分布。体外将Cop-1免疫的T细胞与小胶质细胞共培养,并与Cop-1单独刺激的小胶质细胞比较,观察小胶质细胞的活化,并推测此免疫中Cop-1免疫的T细胞与小胶质细胞的相互作用。
结果 Cop-1组和PBS组大鼠视网膜上小胶细胞、巨噬细胞数量均增加,并于第7天达到高峰。Cop-1组小胶、巨噬细胞在免疫后第7天、第10天数量远大于PBS组7天、10天细胞数量(P<0.05),此后随时间推移小胶、巨噬细胞逐渐减少,两组间无统计学差异。Western-blot结果再次证明Cop-1组小胶、巨噬细胞的活化。Cop-1免疫的T细胞与小胶质细胞体外共培养可见小胶细胞活化,小胶活化蛋白TNF-α增多(P<0.05),而Cop-1刺激的小胶细胞无明显小胶细胞的活化。
结论 在Cop-1免疫的大鼠青光眼模型视网膜上,小胶细胞被活化,并且小胶细胞的活化是由Cop-1特异的T细胞免疫介导的。 |