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L型钙通道阻滞剂尼莫地平对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤后细胞信号转导通路的影响
作者:傅映晖,…  文章来源:中国医科大学附属第一医院眼科 110001  点击数1058  更新时间:2004/6/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的:探讨L型钙通道阻滞剂尼莫地平对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用及其对细胞信号转导通路的影响。 方法:Wistar 大白鼠110只,随机分为4组。A组正常(空白)对照组5只,B组视网膜缺血-再灌注组(实验对照组)35只,C组视网膜缺血-再灌注+尼莫地平组(实验组)35只,D组低压灌注组(假手术组)35只,以前房灌注升高眼内压的方法制备大鼠视网膜制备-再灌注模型,分别于再灌注发生后0时、2小时、6小时、12小时、24小时、72小时、168小时各处死5只大鼠,其中2只共4眼石蜡包埋后切片行原位杂交检测,另3只共6眼取神经视网膜层行RT-PCR检测。分别测定7个时点视网膜P38 MAPK 和STAT3 mRNA表达情况(RT-PCR法及石蜡切片上原位杂交法)。原位杂交结果于Metamorph软件上分析,取平均光密度值、RT-PCR结果以柯达1D图像分析系统进行分析,取吸光度值作统计分析。 结果:视网膜缺血-再灌注损伤后,P38 MAPK和STAT3表达增高,均于12-24小时达到高峰。视网膜P38 MAPK和STAT3 mRNA原位杂交信号均位于节细胞层和内核层和细胞核内,正常视网膜只有少量表达。于B组缺血-再灌注后,6小时表达即明显增加,至12小时达到顶峰,持续至24小时,72小时后逐渐下降,至168小时仍未回到恢复到基线水平。C组使用尼莫地平后,P38表达趋势与B组相同,但表达水平下降。STAT3则正相反,于C组表达明显较B组强,且出现时间也提前(再灌注后2小时表达即增强)。RT-PCR结果也印证了上述变化。P38 MAPK mRNA表达,在6小时、12小时、24小时、72小时,B组与C组,B组与A组,C组与A、D组间存在统计学显著性(P<0.05),而6小时和168小时,A、D组与B组及A、D组与C组存在统计学显著性(P<0.05)(方差分析+SNK检验)。STAT3 mRNA表达则不同,在2小时C组与另三组间存在统计学显著性(P<0.05),而6小时之后,B组与C组,B组与A组,C组与A、D组间存在统计学显著性(P<0.05)(方差分析+SNK检验)。 结论:P38 MAPK和STAT3均参与了视网膜缺血-再灌注损伤中视网膜神经细胞信号的转导,尼莫地平通过使下调P38 MAPK的表达同时上调STAT3的表达的而实现对视网膜的保护作用。
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