| 目的 观察氯通道蛋白3基因反义寡核苷酸（antisense oligonucleotides, AS-ODN）在内皮素1(ET-1)对培养牛角膜内皮细胞增殖中的作用。方法 加入不同浓度的氯通道蛋白3 AS-ODN作用于培养牛角膜内皮细胞后，再加入的200pM ET-1，采用免疫荧光染色检测AS-ODN的摄取。应用流式细胞仪检测细胞周期和MTT比色分析法观察细胞增殖情况。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫印迹（Western blot）检测ClC-3mRNA和蛋白的表达。结果 氯通道蛋白3 AS-ODN可被培养牛角膜内皮细胞摄取。不同浓度的反义氯通道蛋白3处理组MTT光吸收值(OD)值较对照组均显著降低，并具有浓度依赖性。反义氯通道蛋白3基因处理后，细胞G1期细胞比例比对照组明显增高,S期及G2期细胞比例则明显低于对照组。反义氯通道蛋白3基因能减少ET-1促进ClC-3 mRNA和蛋白表达作用，并具有浓度依赖性。结论 氯通道蛋白3 AS-ODN可被培养牛角膜内皮细胞摄取。不同浓度的AS-ODN抑制内皮素1对培养牛角膜内皮细胞的增殖，并使细胞增殖停滞在G1期，同时还能减少ET-1促进ClC-3mRNA和蛋白表达作用，并具有浓度依赖性。 |
