目的 探讨层粘连蛋白(Laminin, Ln)和纤维连接蛋白(Fibronectin, Fn)对原代培养的人晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells, hLECs)的黏附、增殖特性的影响,揭示细胞外基质成分与维持晶状体透明性之间的关系。方法 撕取晶状体前囊膜20个,分别剪碎,分三组接种于Ln、Fn和牛血清白蛋白包被的培养皿。倒置显微镜观察接种后上皮细胞长出的时间、上皮细胞的形态以及成纤维样细胞出现的时间。间接免疫荧光法显示上皮细胞的连接素43(Connexin43, Cx43)、p63和整合素β1(integrinβ1)的表达。RT-PCR检测p63、integrinβ1 mRNA的水平。结果 与对照组相比,Ln和Fn组hLECs的活细胞数量明显增多;但Fn组成纤维细胞的生长较Ln组和对照组明显提前。间接免疫荧光显示,Ln组Cx43表达的阳性率明显高于其他两组(p<0.05);Fn组p63和integrinβ1表达的阳性率明显高于其他两组(p<0.05)。Ln和Fn组的p63和integrinβ1 mRNA水平高于对照组。结论 Fn和Ln对原代培养的hLECs黏附和增殖有促进作用;同时,Fn促进了上皮细胞的分化和成纤维细胞的生长,而Ln则有利于保持hLEC的形态和功能;这对于维持hLEC的生理状态,进而维持晶状体的透明具有重要意义。
关键词 上皮细胞 晶状体 细胞外基质 层粘连蛋白 纤维连接蛋白
Key words: epithelial; lens; extracellular matrix; laminin; fibronectin
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