目的 探讨正常发育过程及单眼剥夺模型大鼠视皮层中Nogo-A及NgR的mRNA及蛋白质表达的动态变化及意义。
方法 84只新生SD大鼠随机分为出生后0天正常组(NorP0),出生后14天正常组(NorP14),出生后28天正常组(NorP28),出生后60天正常组(NorP60),出生后28天单眼剥夺组(MDP28)和出生后60天单眼剥夺组(MDP60),单眼剥夺模型于出生后21天建立。各组动物均依照其年龄处死并取视皮层组织,提取总RNA及蛋白质,通过RT-PCR及免疫印迹Western blot技术检测视皮层中Nogo-A及NgR的动态表达趋势,同时通过免疫荧光组织化学方法检测单眼剥夺对Nogo-A及NgR蛋白在视皮层中表达影响的层特异性。
结果 大鼠在出生后正常发育过程中视皮层Nogo-A mRNA及蛋白质表达水平随年龄明显上调,于出生后28天到达高峰并持续高水平表达。同时,NgR mRNA表达量也随发育而迅速增加,于出生后14天到达高峰并维持较高水平;NgR蛋白表达增加则较mRNA出现滞后,于出生后28天到达高峰并维持较高水平。单眼剥夺后,模型组大鼠视皮层中Nogo-A及NgR mRNA及蛋白质表达较同年龄正常组轻度减少,差异无统计学意义。免疫荧光组织化学方法检测显示Nogo-A及NgR蛋白在视皮层II-III层,IV层,V层,VI层中均有表达。单眼剥夺后Nogo-A及NgR蛋白在视皮层II-III层,IV层中表达明显下调。
结论 Nogo-A及NgR的 mRNA及蛋白质在正常发育的大鼠视皮层中表达随年龄增长而上调并维持较高水平至成年期,其变化趋势与随年龄递减的视皮层可塑性一致。单眼剥夺可使视皮层中Nogo-A及NgR mRNA及蛋白质表达轻度下调,尤其对第II-III层,IV层细胞影响明显。本研究可初步确定Nogo-A及NgR参与视皮层经验依赖可塑性关键期的终止,为探讨可能存在的分子机制奠定了理论基础。
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