目的 本研究通过建立紫外线B(UVB)诱导C57BL/6小鼠白内障的模型,观察不同年龄小鼠晶状体的形态和生化方面经紫外线照射后的改变,来探讨晶状体抗氧化系统在紫外辐射引起的氧化损伤中的重要作用。
方法 1月和16月C57BL/6小鼠给予UVB(302 nm, 14.4 KJ/m2)15分钟照射,48小时后裂隙灯下观察小鼠晶状体变化及收集晶状体上皮(含囊膜)。测定晶状体中谷胱甘肽(Glutathione, GSH)的含量及三磷酸甘油醛脱氢酶(Glyceraldehydes 3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和硫醇转移酶(Thioltransferase, TTase)的活性。Western blot观察两组小鼠的晶状体中蛋白质和GSH形成的二硫化物(Protein-GSH mixed disulfides, PSSG),TTase和硫氧还蛋白(Thioredoxin, Trx)表达的变化。
结果 1月和16月组均出现明显晶状体混浊,混浊部位主要表现为前囊膜下点状混浊。晶状体上皮中GSH的含量照射后均下降。与同年龄对照组相比,1月照射组GSH下降了10%,16月照射组下降了25%。GAPDH活性16月照射组下降了29%,而1月照射组下降了26%。晶状体中TTase活性1月照射组与对照组相比活性增加了16%。Western blot显示,上皮中PSSG的表达随年龄增加而增加,且经紫外线照射后表达明显增加,16月组中较显著。晶状体中TTase和Trx抗氧化酶的表达出现增高。
结论 结果表明晶状体随年龄增加对紫外线损伤的抵抗能力下降。同时TTase和Trx等抗氧化酶的表达上调也说明了他们可能在紫外线引起的氧化损伤中发挥重要作用。 |