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完整以及去上皮羊膜移植术后眼表组织重塑型的研究
作者:揭静  文章来源:厦门大学医学院眼科研究所  点击数256  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的  比较完整羊膜及去上皮羊膜在兔以及人结膜缺损修复术后结膜上皮的愈合以及手术局部的组织再塑型。
方法  选取18只成年雄性新西兰白兔,麻醉后剪除角膜缘颞上方5mm×5mm大小的结膜组织,并移植等大的羊膜组织,右眼移植完整羊膜(iAM),左眼移植去上皮羊膜(dAM)。术后裂隙灯观察术区的炎症反应及结膜上皮愈合情况。不同时间点处死后取术区组织,行collagenVII,K19及K12,a-SMA以及MAC387免疫荧光染色和PAS染色。在此基础上,选择病变程度相近的翼状胬肉患者18只眼,随机分为两组,在实施翼状胬肉切除后,行iAM或dAM移植,术后观察结膜上皮愈合情况。
结果  术区荧光染色结果显示,dAM移植组术区上皮修复速度均明显快于iAM组。H&E染色显示,术后4天dAM组术区上皮明显复层化,而iAM组仍以单层上皮细胞为主。PAS染色结果显示,术后第5天时dAM组术区新生上皮开始出现杯状细胞,术后3周时其数量和形态与正常结膜组织相似;而iAM组杯状细胞在术后第3周才开始出现,数量明显低于其自身非术区正常结膜组织。免疫荧光染色结果示,术后5天内两组植片中均见人VII型胶原阳性染色;术后2周时dAM组术区组织中人VII型胶原染色阴性,而iAM组仍见阳性染色;术后3周仍有表达,但较2周时明显减弱。巨噬细胞特异性抗体MAC387免疫荧光染色示,iAM组术后第5天术区基质中开始出现巨噬细胞浸润,并在2至3周内逐渐增多;而dAM组术后2周时术区基质中才出现MAC387阳性染色细胞,其数量在2周及3周时间点均明显少于iAM组。a-SMA免疫荧光染色结果示,术后第2周时,iAM组术区基质开始出现a-SMA阳性细胞,术后3周时表达明显增强,而dAM组术区整个观测时间范围内均未见a-SMA阳性表达。上皮细胞K12和K19的免疫荧光染色结果示两组无明显差异。翼状胬肉切除联合iAM或dAM移植术后,结膜荧光素染色结果:dAM组术区结膜上皮在7天内完全愈合,而iAM组术后结膜上皮愈合需要10至14天,两组具有显著性差异(p<0.05)。
结论  相比较于完整羊膜,使用去上皮羊膜进行眼表重建时,可以加速结膜上皮的修复以及杯状细胞的分化,减轻修复过程中的炎症细胞浸润,减少再塑型过程中的瘢痕形成。去上皮羊膜可以作为一种新的组织工程材料用于眼表面重建治疗。
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