目的 研究嗅鞘细胞移植到RCS大鼠视网膜下腔后,在视网膜中迁移,抑制视网膜色素变性过程中Muller细胞胶质封闭的作用机制。
方法 原代培养嗅鞘细胞,培养至14天时,将细胞移植到出生30天的皇家外科学院大鼠(RCS rat)单眼视网膜下腔作为实验组,对侧眼行等量PBS移植作为伪手术对照组,未进行任何处理的RCS大鼠作为未处理的对照组。分别在术后7天、14天、21天、28天收集视网膜,用ELISA法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)含量的变化;用RT-PCR、Western Blot方法检测Notch-Delta信号通路的变化;用免疫荧光法检测RCS大鼠视网膜Muller细胞中表达Delta配体的部位。
结果 ELISA结果显示:随时间延长,实验组MMP-2含量明显高于伪手术组和未处理组(p<0.05),伪手术组和未处理组未见显著差异(p>0.05); RT-PCR结果显示:随时间延长,实验组Notch-3表达量逐渐下降,明显低于伪手术组和未处理组(p<0.05),伪手术组和未处理间未见显著差异(p>0.05)。免疫荧光结果显示:视网膜中外丛状层、内核层以及内丛状层为Delta配体的阳性部位。
结论 将嗅鞘细胞移植至皇家外科学院大鼠(RCS rat)视网膜下腔后,嗅鞘细胞可能通过分泌基质金属蛋白酶2(MMP-2)迁移进入视网膜,与Muller细胞接触。通过激活Notch-Delta信号通路,发挥“旁侧抑制”效应,抑制Muller细胞增殖,阻止Muller细胞的胶质封闭。 |