目的  基因重组构建具有穿膜活性的转录因子Sox2、Oct4、Klf4、c-Myc的真核表达系统，将其转染至小鼠角膜基质细胞，检测其在小鼠角膜角质细胞中的表达。

方法 利用重叠延伸PCR法重组目的基因构建质粒，测序检测重组DNA序列是否克隆正确。确定正确序列后将其转染至小鼠角膜基质细胞。倒置显微镜下观察细胞生长情况，转染后第10天免疫组织化学鉴定其表达。

结果  成功构建质粒PCDNA-Sox2、PCDNA-Oct4、PCDNA-Klf4、PCDNA-c-My；测序结果显示对应基因序列正确，可成功转染至小鼠角膜基质细胞中；引起细胞形态变化，荧光免疫组织化学染色检测转染后第10天其在小鼠角膜基质中表达。

结论  成功构建4个转录因子的真核表达系统，可转染至小鼠角膜基质细胞及引起细胞形态和表型的变化，本研究为真核重组外源蛋白诱导角膜基质诱导转化为IPS细胞奠定基础。