目的 探讨抗氧化剂影响TGF-β2诱导的晶状体上皮细胞凋亡及间质化的作用机制,为白内障的防治提供实验依据。
方法 随机选取健康的2-4周家兔,体外培养LECs,取2、3代传代细胞,分别加入A:75pg/mlTGF-ß2;B:75pg/mlTGF-ß2+10mMGSH;C:75pg/mlTGF-ß2+300U/mLCAT;D:10mMGSH;E:300U/mLCAT; F:空白对照组。倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测12、24、48小时的细胞增殖抑制率,TUNEL法检测细胞凋亡,逆转录PCR(RT-PCR)法检测细胞α-SMA mRNA含量,各处理组间比较分析。
结果 1.显微镜下细胞加入75pg/mlTGF-ß2后间隙增加,呈拉网状改变,开始出现肿胀并随时间推移呈梭形改变,加入抗氧化剂后细胞改变减少。2.LECs增殖抑制率差异无统计学意义。3.A组细胞凋亡率分别与B、C组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4.A组α-SMA蛋白mRNA表达分别与B、C组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论 1.TGF-ß2可抑制LECs增殖,并诱导细胞凋亡,促进上皮细胞间质化;2.加入抗氧化剂GSH、CAT后可以降低LECs凋亡及间质化,但对细胞增殖影响不大;3.活性氧可能作为一种细胞信号传导分子参与了TGF-ß2引起的细胞凋亡、间质化过程。
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