目的 建立一种快速、灵敏、特异的眼源性蜡样芽孢杆菌PCR 检测方法，为蜡样芽孢杆菌性眼内炎患者的快速诊断提供依据。
方法 选择编码蜡样芽孢杆菌细胞毒素的cytK为靶基因设计引物，建立检测眼源性蜡样芽胞杆菌PCR；PCR产物用琼脂糖凝胶电泳鉴定，基因序列与GenBank 比对验证扩增产物；将计数过的5株蜡样芽胞杆菌菌悬液，梯度稀释后分别提取DNA进行PCR扩增，确定检测方法的灵敏度；分别用眼部常见感染菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、化脓性链球菌、藤黄微球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、普通变形杆菌和白假丝酵母菌以及枯草芽孢杆菌DNA 进行特异性实验；进一步将该方法应用到人工污染致病蜡样芽孢杆菌的房水标本中，并分析其灵敏度。
结果 5株分离自眼内炎患者标本中的蜡样芽胞杆菌均扩增出360 bp左右的DNA片段，测序结果与GenBank 比对一致；该法检测在5小时内完成，方法灵敏度达7.5-15 CFU/mL；其他菌株检测未出现非特异性扩增；对模拟感染房水标本的PCR鉴定结果与分离培养对比, 二者符合率为100%，模拟标本的检测灵敏度与纯菌结果一致。
结论 cytK基因为靶基因的PCR用于眼源性蜡样芽孢杆菌的快速检测，具有简便、快速、敏感、特异等特点，为眼内炎患者的快速诊断提供依据，在实际检验工作中有良好的应用前景。