目的 观察大鼠视神经钳夹伤后玻璃体腔注射云南苦丁茶有效成分阿克苷（Acteoside）对视网膜神经节细胞RGCs的保护作用及玻璃体腔内注射阿克苷的安全性。
方法    一、阿克苷玻璃体腔注射视网膜毒性研究：通过在大鼠玻璃体腔内注射浓度不同浓度的阿克苷，于不同时间点摘除眼球行切片做HE染色光镜下观察视网膜结构，并行超薄切片通过电子显微镜观察视网膜结构以分析不同浓度阿克苷对视网膜的毒性。 二、阿克苷对视网膜神经节细胞保护作用研究：观察大鼠视神经钳夹伤后手术组(A、B)、假手术组(C、D)和空白组（A、C玻腔注射阿克苷，B、D玻腔注射PBS）不同时间点视网膜切片HE染色后视网膜结构和RGCs数量，通过免疫组化观察各组大鼠视网膜GAP-43表达情况，并通过Tunel观察不同组大鼠RGCs凋亡情况。
结果 1、大鼠玻璃体腔注射不同浓度阿克苷后，眼底镜下均未发现明显眼内炎的症状。HE染色未见视网膜结构紊乱和炎症细胞浸润。透射电镜下见浓度5mg/ml和2mg/ml的阿克苷玻腔注射后大鼠视网膜出现了明显的膜盘肿胀、变形，内核层内细胞线粒体肿胀、空泡样变性等微结构的改变，且术后第三周较第一周无好转。玻腔注射浓度为1mg/ml的阿克苷后，术后一周见膜盘轻度肿胀，术后三周膜盘肿胀减轻。玻腔注射PBS对照组及空白对照组均可见轻微的膜盘肿胀。2、阿克苷对大鼠RGCs保护作用研究：（1）大鼠眼球冰冻切片HE染色：实验组大鼠RGCs可见染色质浓缩、边集及空泡样变性等典型细胞凋亡的病理学改变。建模后一周和两周明显，且A组异常细胞多于B组，第四周时减轻。假手术组和空白对照组未见明显的细胞凋亡的病理学改变。各组各时间点时大鼠视网膜层次结构均清楚，未见紊乱及炎症细胞浸润。RGCs计数:建模后一周和两周时，实验组RGC存活量减少， A组多于B组。四周时实验组RGCs继续减少，低于其余各组，假手术组和空白对照组间RGC的数值在各时间点、各组间比较均无差别。（2）GAP-43免疫组化：建模后一周A、B组IOD明显高于其他几个组，A组与B组间IOD值无差异；第二周实验组IOD组有所下降，A、B组高于其他各组，且A组高于B组；第四周实验组IOD值进一步下降，A组高于其他各组。（3）TUNEL:实验组大鼠（A、B）于建模第一周RGCs的凋亡率明显增加，第二周两组RGCs凋亡率均降低，但A组低于B组。第四周实验组凋亡率明显下降，与其余各组无差异。而假手术组和空白对照组在各时间点和各组间均无差异
结论  1、阿克苷玻璃体腔注射这种给药方式具有可行性；高浓度的阿克苷玻璃体腔注射对大鼠视网膜具有毒性；玻腔注射1mg/ml的阿克苷对大鼠视网膜影响很小,属于安全剂量。2、视神经钳夹伤后大鼠RGCs及INL细胞可见细胞核内染色质浓缩、边聚、空泡样变性等特征性细胞凋亡病理性改变。阿克苷玻腔注药后，凋亡细胞数量减少，程度减轻，玻腔注射阿克苷可促进RGCs的存活。3、玻腔注射阿克苷可增加视神经受损大鼠视网膜上GAP-43的表达，对RGCs的再生具有潜在促进作用。4、玻腔注射阿克苷对视神经钳夹伤大鼠的RGCs凋亡具有一定的抑制作用。