目的 探索促黑激素(α-MSH)对早期糖尿病引起的视网膜血管内皮细胞凋亡和渗漏的保护作用。
方法 以RF/6A猴视网膜-脉络膜血管内皮细胞为体外模型, RT-PCR检测α-MSH受体在此细胞中的表达。以不同浓度的α-MSH预处理细胞后,分别用代表炎性因子和氧化应激因素的TNFα和H2O2刺激细胞,继而(1)AnnexinV染色后,流式细胞计数检测细胞凋亡;(2)MTT检测细胞活力。在确定α-MSH可拮抗TNFα和H2O2诱导的细胞凋亡与活力降低后,用Transwell实验检测α-MSH对TNFα和H2O2引起的细胞渗漏的保护作用。α-MSH对STZ诱导的糖尿病大鼠的视网膜血管内皮损伤的保护作用正在进行中。
结果 RF/6A细胞表达α-MSH 3型和5型受体。TNFα或H2O2显著增加RF/6A细胞中凋亡细胞的百分率,而10μM 的α-MSH可显著抑制TNFα或H2O2诱导的细胞凋亡。MTT亦显示高浓度的α-MSH有增加细胞活力的趋势。Transwell实验和体内实验正在进行中。
结论 初步试验结果显示α-MSH可通过其在内皮细胞表面的受体拮抗炎性因子和氧化应激因素引起的细胞凋亡,增加细胞活力,有可能对糖尿病初期视网膜血管内皮细胞损伤起到保护作用。
|