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UCH-L1在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中表达及其抗氧化作用研究
作者:李帅杰  文章来源:苏州大学附属第二医院眼科中心  点击数244  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 检测泛素羧基末端酯酶L1(ubiqutin carboxyl-terminal hydrolase L1,UCHL1)在人晶状体上皮细胞中的表达趋势,并在细胞水平上研究其是否具有抗氧化应激的保护作用.
方法 首先,采用免疫荧光法检测年龄相关性白内障病人和正常人晶状体前囊膜下上皮细胞中UCHL1表达量;其次,先将SRA01/04细胞分为对照组和梯度TBHP处理实验组共四组,使用0.1mol•L-1、0.5mol•L-1和1 mol•L-1过氧化氢叔丁醇(tert-butyl hydroperoxide,TBHB)处理人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞0h、 3h、6h和12h,采用RT-PCR方法检测UCHL1在不同时间点的表达情况。接着在人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞中过表达UCHL1,以绿色荧光蛋白(GFP) 过表达组为对照,使用梯度TBHB处理24h后;采用MTT法检测两组细胞活性变化。
结果 UCHL1在年龄相关性白内障病人晶状体上皮细胞中的表达量比正常人显著降低(F=11.691,P=0.001);在0.5mol•L-1TBHP作用下,UCHL1在SRA01/04细胞中的表达在3h时降低,6h时升高,而在12h时降低;MTT法结果显示UCHL1过表达组在0.3mol•L-1 TBHB处理24h后,细胞活性明显高于GFP对照组。
结论 综上所述,UCHL1在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞中表达下调,且氧化应激调节UCHL1在人晶状体上皮细胞系SRA01/04细胞株中的表达趋势,同时显示UCHL1具有一定抗氧化保护作用,提示UCHL1在年龄相关性白内障发生发展过程中可能起重要作用。
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