目的 观察慢性高眼压状态下水通道蛋白-l(AQP-1)在家兔角膜内皮细胞上的表达变化。
方法 30只成年家兔随机分为对照组,2、3、4、5周组。非对照组实验兔左眼前房内注入质量分数0.3%卡波姆和质量分数0.025%地塞米松的复方卡波姆溶液0.2 mL,眼压达22 mmHg以上者为制作家兔慢性高眼压模型成功;对照组左眼用同样方法注入平衡盐液O.2 mL。建模后每日测量眼压1次,裂隙灯下观察实验眼结膜、角膜及虹膜组织的反应。注药后2、3、4、5周分别处死各组实验兔并制作角膜标本,应用免疫组织化学法检测角膜内皮中AQP-l蛋白的表达,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测家兔角膜内皮中AQP-1 mRNA在角膜内皮中的表达。所有动物的饲养及处死遵循NIH的《实验动物管理及使用指南》。
结果 建模后实验动物的眼压呈缓慢升高的趋势,3周时达到最高,之后眼压逐渐下降,5周时眼压接近正常。在建模后18-24 d,角膜水肿和虹膜组织炎症反应最严重。AQP-1在正常和高眼压家兔的角膜内皮均有表达,各组间AQP-l的吸光度(A)值差异有统计学意义(F=3.650,P=0.018),AQP-1 mRNA在角膜内皮中的表达量亦随之出现先升高后降低的趋势,各组的总体比较差异有统计学意义(F=4.140。P=0.000)。AQP-1在角膜内皮中的表达量在造模后2、3、4、5周时与对照组问差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论 AQP-1可能在家兔角膜内皮损伤修复过程中起到晕要作用。 |