目的 探讨研究视网膜色素上皮细胞中补体因子H(CFH)表达降低对脉络膜新生血管(CNV)形成的影响
方法 视网膜色素上皮细胞来源于永生化的细胞系ARPE-19,血管内皮细胞来源于新生儿脐带静脉内皮细胞(HUVEC)。常规培养ARPE-19至50%融合时,进行脂质体2000介导的针对CFH的靶向siRNA转染4h,建立HUVEC的3D培养系统,实验组加入siRNA转染后的ARPE-19和人血清,对照组加入未转染ARPE-19和人血清,于处理后1h,2h,4h,8h于倒置相差显微镜下观察血管形成情况,用Image-Pro Plus软件计算血管长度。
结果 在1h,2h,4h,8h时间点,实验组血管形成长度均明显长于对照组,差异有统计学意义(p<0.05),且形成更广泛的血管网。
结论 CFH具有阻止补体系统激活的作用,本实验通过特异性阻断视网膜色素上皮细胞产生CFH,从而使补体系统过度激活,诱导新生血管形成。补体系统与脉络膜新生血管关系密切,有望成为CNV治疗的新靶点。 |