目的 应用miRNA芯片检测高糖环境下人视网膜血管内皮细胞(human retinal capillary endothelial cells, HRCECs)差异表达的miRNA，为探讨miRNA在糖尿病性视网膜病变(diabetic retinopathy, DR)发病机制中的作用打下基础。
方法 1.体外培养HRCECs，用高糖作为刺激因子，将细胞分为三组：a.正常对照组：含25mmol/L葡萄糖；b.高糖组：含90mmol/L葡萄糖；c.甘露醇高渗对照组：含65mmol/L甘露醇+25mmol/L葡萄糖。2.用In Situ Cell Death Detection试剂盒进行凋亡检测；用RNeasy Mini 试剂盒提取总RNA。3.用miRCURY Array Power 标记试剂盒制备荧光标记探针，在标准条件下将标记好的探针与miRNA芯片杂交；对部分差异表达的miRNA进行实时定量PCR验证，运用靶基因预测软件进行靶点预测。
结果 芯片结果显示：与正常对照组相比，在高糖组一共筛选出49个差异表达的miRNAs（上调>2倍或下调<0.5倍），其中表达上调的个，表达下调的18个。对表达上调的has-miR-320c和has-miR-29a*进行实时定量PCR验证，结果显示：在高糖组中has-miR-320c和has-miR-29a*分别是正常对照组的2.97和1.95倍；实时定量PCR结果与芯片结果趋势完全一致；靶基因预测结果表明这些差异表达的miRNA作用靶点非常广泛，其中涉及到不少生长因子和蛋白。
结论 高糖刺激下的HRCECs中存在差异表达的miRNA，对has-miR-320c和has-miR-29a*进行靶基因预测，结果显示它们作用靶点非常广泛，其中涉及到不少生长因子和蛋白。表明这些差异表达的miRNA可能与DR中的新生血管生成有密切联系，但本研究只是对miRNA与DR关系的初步认识，这些miRNA具体作用于哪些靶基因，以及通过哪些通路发挥作用和详细的作用机制还有待以后进一步的研究和探讨。