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Nogo66-壳聚糖疫苗结膜接种对视神经钳夹伤大鼠视神经保护作用机制研究
作者:程茗  文章来源:第三军医大学大坪眼科医院  点击数238  更新时间:2011/9/13  文章录入:毛进  责任编辑:毛进
目的 探讨Nogo66-壳聚糖疫苗结膜接种对视神经钳夹伤大鼠神经保护作用及其机制。
方法 选择正常成年SD大鼠,在球后2mm处用40g力动脉夹夹持视神经40秒建立视神经钳夹伤大鼠模型,随机均分为2组,分别给予Nogo66-壳聚糖疫苗或壳聚糖溶液(1mg/ml)点眼接种,第21天和第35天各加强点眼1次。在末次接种后第7天,FG逆行染色法观察视网膜神经节细胞并计数。在末次接种后第14天左心室灌注后取眼球,免疫荧光法、免疫组化法、免疫印记法检测视网膜GAP43、CD3、BDNF、GDNF表达。
结果 FG逆行标记RGCs显示疫苗组RGCs数量显著高于壳聚糖组 (t=1.843,P=0.009);疫苗组视网膜各层均有GAP43大量表达;壳聚糖组在视网膜各层未见明显表达;疫苗组视网膜节细胞层和内丛状层和内外核层有CD3表达,壳聚糖组视网膜未见明显CD3表达;疫苗组视网膜各层大量表达GDNF和BNDF;壳聚糖组视网膜可见少量GDNF和BNDF表达,主要分布在内丛状层。免疫印记结果显示疫苗组BDNF、GDNF表达量显著高于壳聚糖组(P<0.05)。
结论 Nogo66-壳聚糖疫苗结膜接种后可使视神经钳夹伤大鼠视网膜神经细胞再生增强,RGC数量明显增多,其机制可能与疫苗诱导致敏T淋巴细胞进入视网膜,并分泌BDNF、GDNF等神经营养因子,改善神经细胞再生微环境有关。
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