目的 观察氧化剂-tert-butyl hydroperoxide(TBH) 诱导的氧化应激反应对视网膜色素上皮(Retinal Pigment Epithalium RPE) 细胞迁移的影响及相关机理。 方法 RPE细胞内自由基产物以CM-H2DCFDA染色标记; 细胞的迁移采用改良的 Boyden 腔测定;其存活及黏附通过MTT比色法测定。肌动蛋白(Actin),局部黏附激酶(Focal Adhesion Kinase, FAK)及纽带蛋白(Vinculin)的表达采用免疫荧光染色观察。通过蛋白电泳观察分裂原激活的蛋白激酶(Mitogen-activated Protein Kinase,MAPK)和FAK的表达。结果 TBH处理后RPE细胞内自由基产物增加。TBH对RPE细胞迁移的影响呈双向性,即低浓度增加高浓度抑制。高浓度TBH降低RPE细胞黏附力,也能减少 FAK和vinculin的表达,同时TBH可活化MAPK。结论 由TBH诱导的氧化应激反应既能抑制也能刺激RPE细胞的迁移。其抑制作用可能与FAK和Vinculin表达的降低及细胞骨架结构的变化有关。
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