目的 建立稳定高表达肿瘤转移抑制基因KAI1的RB细胞株。
方法 用含目的基因KAI1和标记基因GFP的慢病毒Lentivirus感染HXO-RB44-GFP-luc和Y79细胞株,应用嘌呤霉素筛选稳定转染KAI1的细胞株HXO-RB44-GlKAI1和Y79-GKAI1。PCR及DNA测序鉴定细胞基因组中KAI1的整合情况,显微镜下观察GFP表达,Western blot鉴定稳转株细胞KAI1的稳定表达情况。
结果 PCR,DNA测序,显微镜下细胞GFP的表达及Western blot检测均证实HXO-RB44-GlKAI1和Y79-GKAI1细胞稳定表达KAI1。
结论 慢病毒可以稳定感染RB细胞。稳定表达肿瘤转移抑制基因KAI1的RB细胞株,将有可能在RB转移研究中有一定的价值。
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