目的 糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy,DR）是糖尿病主要的也是最严重的并发症之一，已经成为目前主要的致盲性眼病，但对于该病的治疗尚不尽如人意。血管内皮生长因子（VEGF）被认为是DR发生发展的关键因子，因此抗VEGF方法为治疗DR带来希望。Muller细胞是分泌VEGF主要的细胞，因此可能成为抗VEGF治疗的靶点。而与组织、细胞增殖相关的ERK1/2信号通路在以往研究中被证实参与调控糖尿病视网膜VEGF的分泌。因此本课题以Muller细胞为切入点，研究ERK1/2信号通路对Muller细胞在高糖环境下分泌VEGF的调控作用。
方法 体外培养Muller细胞，高糖刺激后ELISA、Real-time PCR、Western-blot方法观察VEGF分泌的波动趋势，Western-blot及免疫组化观察ERK1/2信号通路磷酸化表达变化以及通过EMSA及Real-time PCR观察下游AP-1的激活状态；并且拮抗ERK1/2磷酸化激活后观察VEGF的抑制情况。
结果 高糖刺激后细胞VEGF分泌增加，并且在24h达到高峰。高糖刺激24h后，ERK1/2磷酸化增强，并且AP-1出现明显滞后条带，DNA探针结合活性高于正常对照组。高糖刺激细胞24h后，AP-1的两个组成元件， c-Fos和c-Jun的mRNA表达也出现升高。ERK1/2特异性阻滞剂U0126可减少Muller细胞高糖环境下分泌VEGF，并且呈剂量依赖性。
结论 研究结果提示ERK1/2信号通路对糖尿病视网膜Muller细胞分泌VEGF的有一定的调控作用，研究结果为进一步精确运用抗VEGF治疗DR提供了理论依据。