| 目的 探讨转过氧化氢酶基因晶体上皮细胞对氧化损伤耐受性的变化，为白内障的临床预防与治疗提供实验依据。方法 应用稳定转染的方法构建过氧化氢酶基因高表达晶体上皮细胞SRA01/04-CAT，测定CAT的活性。以SRA01/04和SRA01/04-CAT细胞为研究对象，使用过氧化氢为处理因素，MTT方法测定过氧化氢对SRA01/04和SRA01/04-CAT细胞的半数致死量 (IC50)；Annexin V和碘化丙啶双染色分析过氧化氢诱导晶体上皮细胞凋亡作用。Western印迹方法分析凋亡过程中caspase-3的活化。结果 成功构建过氧化氢酶基因表达水平提高的SRA01/04-CAT细胞。SRA01/04-CAT细胞过氧化氢酶的表达水平是SRA01/04细胞的3.5倍，SRA01/04-CAT细胞的过氧化氢酶活性是SRA01/04细胞过氧化氢酶活性的2.2倍。 过氧化氢对SRA01/04细胞的IC50是32.24μM，对SRA01/04-CAT的IC50是85.32μM，转染过氧化氢酶基因后SRA01/04细胞对过氧化氢的耐受能力提高2.65倍。相同培养条件下过氧化氢诱导SRA01/04细胞凋亡率是SRA01/04-CAT细胞的2.1倍。过氧化氢诱导晶体上皮细胞凋亡的过程伴随caspase-3的激活，SRA01/04-CAT细胞caspase-3活化的时间比SRA01/04细胞晚，同一时刻上SRA01/04-CAT细胞caspase-3活化的强度比SRA01/04细胞弱。结论 CAT基因可提高晶体上皮细胞对氧化损伤的耐受性，能够抑制活性氧诱导产生的细胞凋亡效应。过氧化氢酶基因可能是一个较好的候选基因，用于白内障基因治疗。
关键词：过氧化氢酶；晶体上皮细胞；；活性氧; 细胞凋亡 |
