目的:探讨L型钙通道阻滞剂尼莫地平对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤后视网膜神经细胞凋亡的保护作用。
方法:Wistar 大白鼠32只,随机分为4组。A组正常(空白)对照组2只,B组视网膜缺血-再灌注组(实验对照组)10只,C组视网膜缺血-再灌注+尼莫地平组(实验组)10只,D组低压灌注组(假手术组)10只,以前房灌注升高眼内压的方法制备大鼠视网膜制备-再灌注模型,分别于再灌注发生后0时、6小时、12小时、24小时、72小时各处死2只大鼠,剖开眼球,除去眼前节,钝性剥离神经视网膜层,机械法得到细胞悬液,碘化丙啶一步法染色。上FACSCAN流式细胞仪,以Cellquest多功能软件分析各样本细胞周期分布及凋亡情况,获得凋亡细胞百分率,以SPSS软件进行统计学分析。
结果:A组和D组可见明显二倍体峰,亚G0/G1期比率<4%。
B组缺血-再灌注组, 6小时后亚G0/G1峰(凋亡峰)增加,12小时后逐渐增多,至24小时达到顶峰,72小时后下降。C组:趋势与B组相同,所不同为凋亡峰均较小。
以Cellquest 软件进行分析后的凋亡细胞比率进行统计学检验(X2检验),发现B组、C组、D组各时点(0小时除外)比较均具有统计学显著性(P<0.01)。
结论:视网膜缺血-再灌注损伤后的视网膜神经细胞有凋亡发生,凋亡细胞于24小时达到最多。L型钙通道阻滞剂尼莫地平可保护视网膜缺血-再灌注损伤,使凋亡细胞减少。
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