目的  在活体新西兰兔和藏酋猴(Macaca thibetana)中，以本实验室构建的pCDF-MCS2-C3为质粒载体，探索运用超声波-微泡空化效应介导的基因转染技术在青光眼基因治疗中的安全性、有效性及前景。

方法  将300ng/ul的pCDF-MCS2-C3(实验组)或pCDF-MCS2-copGFP(对照组)质粒与SonoVue®微泡以1:1的比例混合。(1)八只成年健康新西兰兔，在戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉下，从双眼前房抽取80ul房水后，分别注射入相应体积的微泡-质粒混合液，左右眼互为对照；随后以声强1W/cm²，占空比20%的条件对角膜缘处超声1分钟。监测转染后3周的每日眼压，并于眼压差别最大时取动物房角制冰冻切片，观察对照组荧光，免疫组化检测C3蛋白表达。(2)六只3岁龄健康藏酋猴，在氯胺酮（15mg/kg）麻醉下，从双眼前房抽取80ul房水后，分别注射入相应体积的微泡-质粒混合液，左右眼互为对照；随后以声强1W/cm²，占空比20%的条件对角膜缘处超声1分钟。在藏酋猴清醒状态下监测转染后3周的每日眼压。

结果  (1)在新西兰兔中，以注射日为0时刻，第2日起出现眼压的显著差异(P<0.05)，第4日达到最大差值为2.96±0.18mmHg (MEAN±SE)，降压效果持续1~2周；(2)在藏酋猴中，以注射日为0时刻，注射后第1日起出现眼压的显著差异(P<0.05)，且为最大差值7.43±1.34 mmHg(MEAN±SE)，降压效果持续1~2周；(3)病理结果显示，房角以及周围的角膜、巩膜均有C3或GFP蛋白的表达。(4)部分个体在注射后1天在前房出现纤维样分泌物，为轻微炎症反应，大部分分泌物在3天内消失；但未发现此炎症反应与眼压下降有显著相关。1只新西兰兔与1只藏酋猴分泌物在1周后消失，眼压未纳入统计。

结论  超声微泡介导的基因转染可应用于青光眼的基因治疗，相对于病毒载体，超声微泡介导的转染技术为青光眼的基因治疗提供了另一种安全且有效的选择。